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普通pcr和熒光定量pcr的區(qū)別

PCR儀也被稱做“基因擴(kuò)增儀”是核酸檢測(cè)、PCR實(shí)驗(yàn)、qpcr實(shí)驗(yàn)常用的儀器設(shè)備，根據(jù)PCR實(shí)驗(yàn)方法主要分為以下幾種：普通PCR儀、梯度PCR儀、熒光定量PCR儀、快速PCR儀、原位PCR儀等。一、普通PCR儀普通PCR是指在PCR過(guò)程中指設(shè)定一個(gè)退火溫度參數(shù)，進(jìn)行樣本的PCR擴(kuò)增。這種PCR儀往往屬于單通道模式，單一的參數(shù)設(shè)定，會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)效率，所以比較適宜用在檢測(cè)量較小，實(shí)驗(yàn)任務(wù)量不大的小規(guī)模PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。比如學(xué)校實(shí)驗(yàn)室，科研機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室等。二、梯度PCR儀...

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細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器放大效果不理想，可能因?yàn)槟銢](méi)有注意到這幾點(diǎn)？

隨著轉(zhuǎn)基因制藥技術(shù)的不斷發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)放大的規(guī)模化需求也在逐漸增大，通常在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的小批量細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)由于投入成本小，操作過(guò)程熟練，基本不會(huì)存在太大問(wèn)題，當(dāng)進(jìn)入生物反應(yīng)器規(guī)模化培養(yǎng)階段時(shí)，投入的成本往往較大，需要考慮的因素也變多，稍不注意就會(huì)影響到細(xì)胞的產(chǎn)量或質(zhì)量。其實(shí)細(xì)胞的培養(yǎng)放大不論是處在哪個(gè)階段的放大都需要保持在同一恒定的環(huán)境下進(jìn)行，這樣才能培養(yǎng)出生長(zhǎng)密度、細(xì)胞存活率、以及培養(yǎng)產(chǎn)物等維持相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。所以在進(jìn)入生物反應(yīng)器擴(kuò)培階段時(shí)，需要注意到以下幾點(diǎn)：一、攪拌槳類型...

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在檢定中八道移液器不合格的原因

在檢定中八道移液器不合格的原因無(wú)外乎就2點(diǎn)：密合性差與容量差。1、密合性超差的主要原因是活塞和密封圈之間間隙過(guò)大，以及密封圈老化造成的，解決的方法是：首xuna更換同規(guī)格的密封圈，其次是在密封圈較好的情況下，在活塞上加注凡士林即可解決。2、容量超差的主要原因有三種：1）密合性超差。密合性超差也將導(dǎo)致容量超差，其解決方法同上。2）容量調(diào)節(jié)器內(nèi)限位器位置不對(duì)。以國(guó)產(chǎn)移液器為例，在檢定某一點(diǎn)時(shí)，容量超差。其解決方法是：用扳手調(diào)節(jié)移液器尾部的容量調(diào)節(jié)孔，容量偏大時(shí)，逆時(shí)針撥動(dòng)扳手，使...

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HEK293T 細(xì)胞與HEK293是同一種細(xì)胞嗎？

如果您*熟悉細(xì)胞培養(yǎng)，您可能聽(tīng)說(shuō)過(guò)HEK293細(xì)胞。HEK293細(xì)胞新藥實(shí)驗(yàn)室較為常用的細(xì)胞系之一。但它們是什么？為什么要使用它們？“293”是什么意思？與HEK293T細(xì)胞相同嗎？請(qǐng)繼續(xù)閱讀這些問(wèn)題的答案以及更多內(nèi)容。一、什么是HEK293細(xì)胞？HEK293細(xì)胞是人類胚胎腎細(xì)胞，起初由荷蘭生物學(xué)家AlexVanderEb在1970年代初期分離和培養(yǎng)。VanderEb實(shí)驗(yàn)室的博士后FrankGraham用剪切的腺病毒5(Ad5)DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染。這是他們的第293次實(shí)驗(yàn)，所以就...

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細(xì)胞外泌體分離方法

標(biāo)簽：外泌體離心分離外泌體分離高速離心機(jī)細(xì)胞外泌體在生物流體中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞外囊泡包括來(lái)自內(nèi)體，多泡體的細(xì)胞外泌體（30nm至150nm）和來(lái)自質(zhì)膜的微泡（150nm至1000nm）。目前已知有多種從生物體液中分離外泌體的方法出了使用高速離心機(jī)的離心分離法以外，還有色譜法、超濾過(guò)濾法、基于聚合物的沉淀和免疫分離法等。這些細(xì)胞外泌體分離方法提取的外泌體要警惕非外泌體顆粒污染，如凋亡小體、凋亡小囊泡、外泌體和脂蛋白，均會(huì)對(duì)獲得的外泌體生物活性產(chǎn)生影響。另外，分離方法也會(huì)影響細(xì)胞外泌體...

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