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熒光定量pcr常見問題的可能原因與解決方案

熒光定量pcr常見問題的可能原因與解決方案無Ct值或Ct值延遲出現:擴增曲線信號不佳，曲線不平滑:標準曲線線性差。1.擴增產物大小不合適：實時熒光定量PCR擴增片段的長度通常在80-150bp之間，如果調整反應的時間有可能擴增500bp的片段。2.PCR反應過程中退火及延伸的時間過短或過長：應根據擴增片段的大小予與調整。3.MgCl,濃度不合適：按0.5mm的間距調整MgCI2的濃度。4.循環數設置不足：最少設置35個循環，可以增加到45個循環。超過45個循環以上背景信號會增...

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消毒和滅菌的區別

微生物行業及微生物實驗室經常會用到消毒、滅菌和清潔那么清潔、消毒和滅菌的區別是什么呢？滅菌滅菌的定義是破壞或消除所有形式的微生物生命的過程，并通過物理或化學方法在設施中進行。加壓蒸汽、干熱、EtO氣體、過氧化氫氣體等離子體和液體化學品是醫學環境設施中使用的主要消毒劑。其實滅菌和消毒是有區別的，一些衛生專業人員以及技術和商業文獻將“消毒”稱為“滅菌”，將物品稱為“部分無菌”。當化學品被用來破壞所有形式的微生物生命時，它們可以被稱為化學消毒劑。這些用于較短暴露時間的相同殺菌劑也可...

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季銨鹽類消毒劑是什么

季銨鹽類消毒劑是什么？季銨化合物廣泛用作消毒劑。季銨鹽是較好的清潔劑，但高硬度的水和棉和紗布墊等材料會使它們的殺菌性降低，因為不溶性沉淀物或棉布和紗布墊分別吸收了活性成分。季銨化合物與其他幾種消毒劑（例如酚類物質、碘伏）一樣，革蘭氏陰性菌可以在其中存活或生長。季銨化合物消毒劑的化學性質在化學上，季銨鹽是有機取代的銨化合物，其中氮原子的化合價為5，其中四個取代基(R1-R4)是給定大小或鏈長的烷基或雜環基，第五個(X-)是鹵化物、硫酸鹽或類似的自由基.每種化合物都表現出自己的抗...

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過氧化氫消毒液的應用

過氧化氫消毒液的消毒原理：過氧化氫的作用是產生破壞性的羥基自由基，這些自由基可以攻擊膜脂、DNA和其他基本細胞成分。由具有細胞色素系統的需氧生物和兼性厭氧菌產生的過氧化氫酶可以通過將過氧化氫降解為水和氧氣來保護細胞免受代謝產生的過氧化氫的影響。過氧化氫消毒液的滅菌活性：過氧化氫對多種微生物具有活性，包括細菌、酵母菌、真菌、病毒和孢子。0.5%的加速過氧化氫在1分鐘內表現出殺菌和殺病毒活性，在5分鐘內表現出殺分枝桿菌和殺真菌活性。尿液中過氧化氫的殺菌效果和穩定性已被證明可對抗多...

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細胞傳代的步驟-貼壁細胞傳代培養步驟

傳代培養是細胞培養常規保種方法之一，也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋，分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。本實驗以傳代大鼠骨髓充間質干細胞為例進行細胞傳代的步驟做一介紹。一、傳代前準備實驗開始前，將無菌培養瓶、15ml離心管、移液管、槍頭等放入無菌超凈工作臺，紫外線照射30mi...

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