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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中PCR儀器選購技巧

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是無數(shù)研究和測(cè)試實(shí)驗(yàn)室的主要技術(shù)，涉及的領(lǐng)域包括生物醫(yī)學(xué)、基因編輯、食品微生物學(xué)測(cè)試等。熒光定量PCR技術(shù)使用熱循環(huán)來促進(jìn)一系列反應(yīng)，在這些反應(yīng)中，DNA樣本會(huì)快速、呈指數(shù)地復(fù)制，從而產(chǎn)生數(shù)百萬或數(shù)十億個(gè)序列拷貝。購買PCR儀器時(shí)，重要的是要考慮您的應(yīng)用的最終目標(biāo)、熱循環(huán)設(shè)備的準(zhǔn)確性和效率以及儀器的容量和靈活性。本文概述了PCR儀器可用的不同選項(xiàng)和功能，以幫助您選購合適的PCR儀。1.PCR與qPCR與dPCR雖然所有PCR系統(tǒng)都使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)復(fù)...

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應(yīng)用差速離心法分離外泌體的原理

外泌體是一種小的(40-100nm)細(xì)胞外膜囊泡，目前進(jìn)行外泌體分離的普遍方法是差速離心法。應(yīng)用差速離心法和粒徑分析等是細(xì)胞外囊泡(EV)研究的重要步驟。已知細(xì)胞會(huì)分泌許多膜囊泡，這些囊泡的大小、分子含量及其形成機(jī)制各不相同具體取決于細(xì)胞的類型和當(dāng)前狀態(tài)。通常可以辨別出三個(gè)主要的EV群體：凋亡小體、脫落的囊泡和外泌體.凋亡小體是已知較大的囊泡，直徑為800-5000nm，由凋亡后細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和質(zhì)膜成分組成。脫落的囊泡和外泌體由非凋亡細(xì)胞釋放。脫落的囊泡，也稱為“胞外體”或有時(shí)...

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影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境主要通過CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱（即溫度、濕度、O2和CO2張力）和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基及其補(bǔ)充劑來實(shí)現(xiàn)。這不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質(zhì)、生長因子、激素等營養(yǎng)素的供應(yīng)，還包括控制培養(yǎng)物pH值和細(xì)胞滲透壓等理化特性的成分。此外，固體或半固體生長基質(zhì)和細(xì)胞密度分別允許細(xì)胞-基質(zhì)錨定和細(xì)胞-細(xì)胞相互作用，這進(jìn)一步控制了生理相關(guān)微環(huán)境的模擬。為滿足特定細(xì)胞類型的要求，市場(chǎng)上已有多種細(xì)胞培養(yǎng)基組合物，并且可以根據(jù)它們補(bǔ)充血清的水平進(jìn)行分類。胎牛血清(FBS)形式的血...

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外泌體制造需要哪些實(shí)驗(yàn)室設(shè)備

外泌體是蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸的天然載體，在細(xì)胞間通訊中起著至關(guān)重要的作用。外泌體包含各種膜蛋白，例如內(nèi)體相關(guān)蛋白（Alix、Tsg101和Rab蛋白）、四跨膜蛋白（CD63、CD81、CD82、CD53和CD37）和脂筏相關(guān)蛋白（糖基磷脂酰肌醇和flotillin）。隨著近年來生物技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的不斷發(fā)展，外泌體有著廣泛的應(yīng)用前景，包括藥物發(fā)現(xiàn)、配體篩選和靶向藥物遞送。進(jìn)而即用型、高質(zhì)量的功能性外泌體的需求也越來越顯明，這種工業(yè)外泌體生產(chǎn)需要通過大規(guī)模外泌體制備和純化來實(shí)現(xiàn)。...

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生物實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器的洗滌方法

生物實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器的洗滌方法玻璃儀器是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)器皿，生物實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器的正確洗滌方法有哪些呢？實(shí)驗(yàn)室器皿清晰時(shí)有哪些需要注意的呢？1.潔凈劑及其使用范圍常用的潔凈劑有肥皂、合成洗滌劑（如洗衣粉）、洗液（清潔液）、有機(jī)溶劑等。肥皂、合成洗滌劑等一般用于可以用毛刷直接刷洗的儀器，如燒瓶、燒杯、試劑瓶等非計(jì)量及非光學(xué)要求的玻璃儀器。肥皂、合成洗滌劑也可用于滴定管、移液管、量瓶等計(jì)量玻璃儀器的洗滌，但不能用毛刷刷洗。洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃儀器，如滴定管、移液管、量瓶、...

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